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實驗十六 觀察細胞的有絲分裂(必修一P115)
一 實驗原理:
1.在高等植物體內(nèi),有絲分裂常見于根尖、芽尖等分生區(qū)細胞。由于各個細胞的分裂是獨立進行的,因此在同一分生組織中可以看到處于不同分裂時期的細胞。
2.染色體容易被堿性染料(如龍膽紫溶液)著色,通過在高倍顯微鏡下觀察各個時期細胞內(nèi)染色體(或染色質(zhì))的存在狀態(tài),就可判斷這些細胞處于有絲分裂的哪個時期,進而認識有絲分裂的完整過程。
二 觀察細胞有絲分裂的實驗過程
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一、根尖的培養(yǎng) |
置于溫暖處,常換水。 |
因為細胞分裂和生長需要水分、適宜的溫度和氧氣。 |
二、裝片的制作 (解離→漂洗→染色→制片) 1.解離: 解離液:質(zhì)量分數(shù)為15%的鹽酸和體積分數(shù)為95%的酒精的混合液(1:1) |
解離時間要助力,細胞才能分散開來。 解離時間也不宜過長。 |
目的:溶解細胞間質(zhì),使組織中的細胞相互分離開來。此時,細胞已被鹽酸殺死。 否則,根尖過于酥軟,無法取出。 |
2.漂洗:清水的玻璃皿中漂洗約10 min。 |
漂洗要充分,可換水1~2次。 |
目的:洗去解離液,便于染色。 |
3.染色:質(zhì)量濃度為0.01g/mL或0.02g/mL的龍膽紫溶液的玻璃皿中染色3~5min。 |
染色時間不宜過長,否則顯微鏡下一片紫色,無法觀察。 |
龍膽紫等為堿性染料,可使染色體著色。醋酸洋紅溶液也能使染色體著色 |
4.制片:用鑷子將這段洋蔥根尖取出來,放在載玻片上,加一滴清水,并用鑷子尖把洋蔥根尖弄碎,蓋上蓋玻片,在蓋玻片上再加一片載玻片。然后,用拇指輕輕地壓載玻片,使細胞分散開來。 |
要弄碎根尖,再垂直向下均勻用力壓片,不可移動蓋玻片, |
目的:使細胞分散,避免細胞重疊,便于觀察。做得成功的裝片,標本被壓成云霧狀。 |
三、觀察 1.低倍鏡觀察:把裝片放在低倍鏡下,慢慢移動裝片,找到分生區(qū)細胞。 2.高倍鏡觀察:移走低倍鏡,換上高倍鏡,用細準焦螺旋和反光鏡把視野調(diào)整清晰,仔細觀察,找出處于細胞分裂期中期的細胞,再找出前期、后期、末期的細胞。 |
一定要找到分生區(qū)。 在一個視野里,往往不容易找全有絲分裂過程中各個時期的細胞。可以慢慢地移動裝片,從鄰近的分生區(qū)細胞中尋找。 |
分生區(qū)細胞特點是:細胞呈正方形,排列緊密,有的細胞正處于分裂期。 |
三 討論
制作好洋蔥根尖有絲分裂裝片的關(guān)鍵是什么?
答:制作好洋蔥根尖有絲分裂裝片的關(guān)鍵有以下幾點:(1)剪取洋蔥根尖材料時,應(yīng)該在洋蔥根尖細胞一天之中分裂較活躍的時間;(2)解離時,要將根尖細胞殺死,細胞間質(zhì)被溶解,使細胞容易分離;(3)壓片時,用力的大小要適當(dāng),要使根尖被壓平,細胞分散開。
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