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實驗二 物質(zhì)鑒定
還原糖 + 斐林試劑~磚紅色沉淀 脂 肪 + 蘇丹III ~橘黃色 脂 肪 + 蘇丹IV~ 紅色
蛋白質(zhì) + 雙縮脲試劑 ~紫色反應(yīng)
1、還原糖的檢測
(1)材料的選。哼原糖含量高,白色或近于白色,如蘋果,梨,白蘿卜。
(2)試劑:斐林試劑(甲液:0.1g/mL的NaOH溶液,乙液:0.05g/mL的CuSO4溶液),現(xiàn)配現(xiàn)用。 (3)步驟:取樣液2mL于試管中→加入剛配的斐林試劑1mL(斐林試劑甲液和乙液等量混合均勻后再加入)→水浴加熱2min左右→觀察顏色變化(白色→ 淺藍(lán)色→磚紅色)
2、脂肪的檢測
(1)材料的選。汉玖吭礁叩慕M織越好,如花生的子葉。
(2)步驟: 制作切片(切片越薄越好)將較薄的花生切片放在載玻片中央 ↓
染色(滴蘇丹Ⅲ染液2~3滴切片上→2~3min后吸去染液→滴體積分?jǐn)?shù)50%的酒精洗去浮色→吸去多余的酒精) ↓
制作裝片(滴1~2滴清水于材料切片上→蓋上蓋玻片) ↓
鏡檢鑒定(顯微鏡對光→低倍鏡觀察→高倍鏡觀察染成橘黃色的脂肪顆粒)
3、蛋白質(zhì)的檢測
(1)試劑:雙縮脲試劑(A液:0.1g/mL的NaOH溶液,B液:0.01g/mL的CuSO4溶液) (2)步驟:試管中加樣液2mL→加雙縮脲試劑A液1mL,搖勻→加雙縮尿試劑B液4滴,搖勻→觀察顏色變化(紫色) 考點提示:
(1)常見還原性糖與非還原性糖有哪些?
葡萄糖、果糖、麥芽糖都是還原性糖;淀粉、蔗糖、纖維素都是非還原性糖。
(2 )還原性糖植物組織取材條件?
含糖量較高、顏色為白色或近于白色,如:蘋果、梨、白色甘藍(lán)葉、白蘿卜等。
(3)研磨中為何要加石英砂?不加石英砂對實驗有何影響?
加石英砂是為了使研磨更充分。不加石英砂會使組織樣液中還原性糖減少,使鑒定時溶液顏色變化不明顯。
(4)斐林試劑甲、乙兩液的使用方法?混合的目的?
為何要現(xiàn)混現(xiàn)用? 混合后使用;產(chǎn)生氫氧化銅;氫氧化銅不穩(wěn)定。
(5)還原性糖中加入斐林試劑后,溶液顏色變化的順序為: 淺藍(lán)色 棕色 磚紅色 (6)花生種子切片為何要薄? 只有很薄的切片,才能透光,而用于顯微鏡的觀察。
(7)轉(zhuǎn)動細(xì)準(zhǔn)焦螺旋時,若花生切片的細(xì)胞總有一部分清晰,另一部分模糊,其原因一般是什么? 切片的厚薄不均勻。
(8)脂肪鑒定中乙醇作用? 洗去浮色。
(9)雙縮脲試劑A、B兩液是否混合后用?先加A液的目的。怎樣通過對比看顏色變化? 不能混合;先加A液的目的是使溶液呈堿性;先留出一些大豆組織樣液做對比。